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請問蛋白質Bradford方法的詳細步驟.謝 - 酒精

Mason avatarMason · 2010-01-08

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各位大大好:因為配置上有很多種方式.所以想再確認一下我使用的蛋白標準液為Bovineserumalbumin(BSA,Sigma)2mg一瓶裝的那種.所配置的蛋白質分析反應劑係利用0.1gCoomassieBrilliantBlueG-250溶於50ml95%酒精中.再加入100ml85%磷酸.最後定量至1L.想請問一下....1.標準液與蛋白質分析反應劑的添加比例為?2.這樣的配置方式是��
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Sandy avatarSandy2010-01-12
標準的是100ulstander/sample+3ml的Bradford如果要用96well可以照比例縮減->8ulstander或8ulsample加240ulBradfordSolution^_^96well裝300ul會很滿2010-01-0816:56:16補充：直接加不需要外加緩衝液...
Hedda avatarHedda2010-01-11
大概加了緩衝劑導至呈色反應被競爭或抑制使吸光值壓低我曾測試過標準蛋白BSA與BGG和純化的抗蟲蛋白在NaCl溶液或醋酸銨溶液內的吸光值鹽類濃度由0mM20mM50mM100mM150mM~到600mM等每一濃度下序列稀釋蛋白濃度由0510152025ug/ul去做標準線,雖均為直線r^2都0.99以上,但鹽濃度越高則斜率越平(一般超過100或150mM)600mM那